Мобильная версия сайта Библиотека Здоровья - Большая медицинская библиотека
Поиск по сайту
Спросить доктора
Дарим книги!
Библиотека Здоровья - Большая медицинская библиотека

матка, яичник, маточная труба, яйцеклетка

Генотип HLA DQB1, кодирующий аспартат в позиции 57, связан с аутоиммунитетом к 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназе при преждевременной яичниковой недостаточности

S.Arif, J.A.Underhill, P.Donaldson et al

J.Clin. Endocrinology&Metabolism, 1999,Vol 84, No3, pp 1056-1060

         Введение

Преждевременная яичниковая недостаточность (ПЯН) - это потеря функции яичников до 40 лет, является важной причиной первичного и вторичного бесплодия. У многих женщин механизм ПЯН не объяснен,  около 20% случаев идиопатической ПЯН приписывают аутоиммунный механизм развития. В пользу этой гипотезы служит наличие аутоантител против антигенов яичников, лимфоцитарная инфильтрация по результатам биопсии яичников и связь между развитием ПЯН и других аутоиммунных расстройств.

         Одним из классов аутоантител, описанных при ПЯН, являются аутоантитела к стероидным клеткам, взаимодействующие с корой надпочечников, яичниками и тестикулами. Мы идентифицировали основную мишень АСК - фермент стероидных клеток 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназа (3-бетаГСД), аутоантитела к этому ферменту обнаружены у 21% пациенток с идиопатической ПЯН. Мы предположили, что аутоантитела к 3-бета-ГСД могут быть маркером истинной аутоиммунной ПЯН и использоваться для подбора иммунной терапии пациенткам, предположительно наиболее к ней чувствительным. В настоящем исследовании мы искали дальнейших подтверждений тому, что наличие аутоантител к 3-бетаГСД определяют подгруппу ПЯН с аутоиммунным патогенезом. Многие известные органоспецифические аутоиммунные нарушения связаны с генами HLA 2класса. Продукты генов HLA 2 класса (участка хромосомы 6р21.3), включая те, что кодируют молекулы HLA-DR, -DQ, -DP. Эти гликопротеиды клеточной поверхности представляют собой пептидные антигены CD4+Т-хелперов и играют ключевую роль в иммунном ответе. Гены HLA -DR, -DQ, -DP обладают высокой степенью полиморфизма. Имеют множество различных аллельных форм, формируя молекулы с разными пептидо-связывающими свойствами. Мы определяли генотипы HLA DRB1, DQB1 когорте пациенток с идиопатической ПЯН, включая подгруппу пациенток с антителами к 3-бетаГСД как маркером аутоиммунной патологии.

         Пациентки

         В исследование были включены 118 женщин с идиопатической ПЯН (средний возраст наступления 26 лет, 11-39 лет). ПЯН определяли как гипергонадотропную аменорею с сывороточными уровнями ЛГ и ФСГ более 10 МЕ/л, измеренные дважды, и отсутствие менструаций в течение как минимум. Пациентки с синдромом Тернера, кастрационным синдромом, галактоземией и дисгенезией гонад 46, ХУ были исключены из исследования.

         У 17 пациенток аменорея была первичная, у 101- вторичная. Болезни Аддисона не было ни у кого. У 4 пациенток была аутоиммунная патология щитовидной железы, из нх у 3 - гипотиреоз, корригируемый Л-тироксином, а у 1 - болезнь Грейвса.

         Скрининг аутоантител

         Аутоантитела к 3-бетаГСД измеряли методом вестернблот. Антитела к стероидпродуцирующим клеткам определяли с помонью непрямой иммунофлюоресценции на срезах надпочечников, тестикул и яичников обезьян. Аутоантитела к тиреоглобулину и тиреоидной пероксидазе определяли с помощью агглютинации в геле.

HLA-типирование

Аллели 32 антигенов HLA класса 2 DRB1, DQB1 определяли с помощью ПЦР-амплификации. Контрольную группу составили 134 женщины из тех же географических областей, что пациентки с ПЯН.  В отсутствии генеалогических сведений невозможно было определить истинные гаплотипы, т.о определяли только избранные.

Результаты

Из 118 пациенток с ПЯН, участвовавших в исследовании, ДНК образцы были доступны у всех, образцы сыворотки - у 97 пациенток.

В начале мы сравнивали частоту генотипов HLA DR и DQ у пациенток с ПЯН и контрольной группы.  Единственным достоверным различием было повышение частоты встречаемости генотипа DRB1*1101/3 у пациенток с ПЯН (хи квадрат=8,0, р < 0,0047).  Повышение частоты встречаемости DQB1*0603 и 0301 также отмечалось (хи квадрат =4,2 и 5,03, соответственно, р = 0,041 и 0.025, соответственно), а также снижение частоты встречаемости генотипа DQB1*0302.

Когда пациенток разделили на группы с и без антител к 3-бетаГСД (Табл. 1 и 2), наметились явные тенденции. У 21 из 97  (21,6%) пациенток были аутоантитела к 3-бетаГСД.  У пациенток с ПЯН и антителами к 3-бетаГСД  была повышена частота встречаемости аллелей DQB1*0603 (25%) и 0301 (42,9%) по сравнению с контрольной группой (6,0% и 33,6%, соответственно; хи-квадрат=7,5 и 4,3; р=0,006 и 0,037, соответственно. Повышение частоты встречаемости генотипа DQB1*0301 сочеталось со значительно более высокой частотой гаплотипа DRB1*04/DQB1*0301, который был представлен у 9 пациенток (21,4% из возможных гаплотипов) с аутоантителами к 3-бетаГСД и только у 20 женщин контрольной грппы (7,5%, хи-квадрат=8,35, р=0,0039).

Анализ 57 позиции цепи DQ-бета

Повышение частоты встречаемости генотипов DQB1*0603 и 0301 у пациенток с ауотанителами к 3-бетаГСД, а также снижение частоты встречаемости DQB1*0302 особенно интересно при анализе аминокислотной последовательности DQ-бета цепей.

Помимо участков полиморфизма в локусе DQB1 GQB1*0603 и -0301 кодируют идентичные аминокислотные остатки в позициях 14, 38, 57, 71, 74-75, 77 и 116. Единственное положение, отличающееся от DQB1*0302 - это позиция 57. В аллелях 063 и 0301 эта позиция занята аспартатом, а в аллеле 0302 - аланином. Имея это в виду, мы определяли частоту DQ-бета-Asp57-кодирующих генов, а именно: DQB1*0301, 0303, 0402, 0503, 0601-3 (DQB1*0203, 0401, 0306, 0607, 0611, 0614) - табл. 3 Частота DQбета-Asp57-кодирующих генов у пациенток с аутоантителами к 3-бета-ГСД составила 7 из 42 гаплотипов по сравнению со 109 из 268 в контрольной группе (хи квадрат=8,2, р = 0,004) и 9 из 21 (48%) пациенток были гомозиготными по сравнению с 17 из 134 (12,7%) в контрольной группе (хи квадрат=11,8, р=0,0006).

Напротив, распределение гаплотипов DRB1 и DQB1 у пациенток с ПЯН, негативных по аутоантителам 3-бетаГСД, совпадало с таковым в контрольной группе, с 1 исключением.  В негативной по аутоантителам группе была аномально повышена частота гаплотипа DR11-DQB1*0301 - у 76 (21%) по сравнению с 16 из 134 (11,9%) контрольной группы (хи-квадрат=9,5, р= 0,002).

Аутоантитела к тироидным антигенам и стероидпродуцирующим клеткам

Аутоантитела к стероидпродуцирующим клеткам обнаружились у 4 пациенток - к 3-бетаГСД (в зонах клубочковй и пучковой) - но не к 21-альфа-гидроксилазе (во всех трех зонах). Антитела к яичниковой ткани присутствовали у 1 пациентки. Частота аутоантител к тироидным микросомам и тиреоглобулину соответствовала описанной ранее. Ни у одной пациентки контрольной группе таких антител не было.

Принятие этих аутоантител как маркеров аутоиммуннитета у пациенток с ПЯН не повысило значимость какой-либо ассоциации HLA.

Обсуждение

В настоящем исследовании мы изучали распределение генотипов HLA-DRB1 и DQB1 у пациенток с идиопатической ПЯН, у которых мы также определяли аутоантитела к ферменту  стероидпродуцирующих клеток - 3-бетаГСД. Целью исследования было оценить взаимосвязь между аутоиммунитетом к 3-бетаГСД и определенными генотипами HLA-DRB1 и HLA-DQB1, чтоб пролить свет на возможную роль этого фермента в патогенезе яичниковой недостаточности. Наши результаты показали, что генотипы DQB1*0301 и -0603 чаще обнаруживаются у пациенток с ПЯН и аутоантителами к 3-бетаГСД. Мы показали, что у пациенток с ПЯН, имеющих аутоантитела к 3-бетаГСД, чаще имеются гены DQбета-цепи, кодирующие аспартат в 57 позиции, и чаще, чем у женщин контрольной группы, определяется гомозиготность по этим генам.

Молекулы HLA 2 класса, DR и DQ являются гетеродимерами, каждый из которых состоит из альфа- и бета-цепей, приблизительно 29-34 кДа. Гетеродимеры формируют комплексы с короткими пептидами (13-24 аминокислоты), образующихся в результате ферментативного процессинга экзогенных или аутоантигенов. Пептиды связываются со специальными связывающими участками, затем комплекс молекула/пептид экспрессируется на поверхности антиген-презентирующей клетки для презентации антиегн-специфическим рецепторам на CD4+ Т-хелперах. Между людьми антигены HLA 2 класса обладают выраженным полиморфизмом, что приводит к вариабельности специфических аминокислотнх остатков в антиген-связывающих участков. Это оказывает влияние на степень связывания пептидов, которое, в свою очередь, влияет на созревание и периферическую активацию Т-клеток, хотя пока еще точно не известно, как эти события способствуют развитию аутоиммунной патологии.

Многие известные аутоиммунные расстройства связаны с генотипом HLA - генами HLA-DRB1 и HLA-DQB1: инсулнзависимый сахарный диабет (DQB1*0302), целиакия (DQB1*0201), буллезный пемфигоид (DQB1*0301), аутоиммунный гепатит (DRB1 гены, кодирующие лизин в позиции 71 DR-бета-цепи). 57 позиция HLA-DR занимает ключевое положение в связывающем участке. Аспартат в позиции 57 способствует формированию мостика с аргинином в позиции 76 альфа-цепи, а в отсутствии аспартата в этом положении такая конформация невозможна. Это единственное аминокислотное различие оказывает значительное влияние на степень связывания пептидов, а следовательно - на иммунный ответ.

Предыдущие исследования также пытались определить HLA-ассоциации с ПЯН. Наше исследование на небольшой группе пациенток (19 человек) отметило взаимосвязь между HLA-DR3,  обнаруженным у 48% пациенток (по сравнению с 23% в контроле), другие исследователи обнаружили слабую связь с HLA-DR4, а еще одни - отсутствие всякой взаимосвязи. Каждое исследование базировалось на серологическом определении HLA-DR, и ни одно не включало подгруппу пациенток с аутоантителами. Серологическое исследование дает менее достоверные результаты, чем ДНК-техника, использовавшаяся в настоящем исследовании, и не позволяет различить основные аллели HLA-DQB1.

Интересно, что высокая частота встречаемости генов HLA-DRB1*1101/3, которую мы зафиксировали у наших пациенток, была именно у тех пациенток, у которых отсутствовали аутоантитела к 3-бетаГСД. Мы рискуем предположить, что пациенты с генотипом DRB1*11 могут образовывать другую подгруппу пациенток с аутоиммунной ПЯН, у которых мишень воздействия аутоантител не является 3-бета-ГСД

Перевод Малярской М.М.

 

Читайте также:

Биохимический анализ крови

Группа крови

Общий анализ крови

Резус-фактор

Коагуллограмма

Иммунология

Гормоны

Гепатиты,

Онкомаркеры

Другие инфекции

Цитология и гистология

Мифы об анализах

Мифы об анализах. Часть 2.

Фотогалерея глистов

Сюрпризы дальнего вояжа (тропические болезни)

Мифы о медицине

Географические карты тропических болезней

Самодиагностика

Когда дисбактериоз лечить не нужно.

Диагностический ликбез

Диагностический ликбез-2 

Как “читать” анализ на дисбактериоз

Хороший врач поможет сэкономить на лечении

Из кабинета в кабинет

Что посеешь...

Поделиться или сохранить себе

Статьи
Лекарства
Безопасность лекарств

Рубрикатор по Мед2000.ru

Анализы

Акушерство

Аллергология

Андрология

Гастроэнтерология

Гематология

Гинекология

Дерматология

Диетология

Иглотерапия

Иммунология

Инфекции

Кардиология

Косметология

Неврология

Нефрология

Онкология

Оториноларингология (ЛОР)

Паразитология

Педиатрия

Психиатрия

Психология

Пульмонология

Ревматология

Сексология

Стоматология

Терапия

Урология

Фармакология

Хирургия

Эндокринология

Эпидемиология

Другие специальности

 

Энциклопедии

Вопросы и ответы

Анализы. Инфекции

Аллергии

Здоровый человек

Атопический дерматит

Секс

Термины

Материалы ВОЗ

Нетрадиционные методы

Сам себе 03

Прививки

Косметика

 

Лекарства

От А до Й

От К до Н

От О до С

От Т до Я

 

Психология

Рецепты

 

Врачу

Справочник врача

Научные статьи, тезисы, литобзоры, методички

Переводы

Скорая помощь

 

Рубрикатор: Анализы, Акушерство, Аллергология, Андрология, Гастроэнтерология, Гематология, Гинекология, Дерматология, Диетология, Иглотерапия, Иммунология, Инфекции, Кардиология, Косметология, Неврология, Нефрология, Онкология, Оториноларингология (ЛОР), Паразитология, Педиатрия, Психиатрия, Психология, Пульмонология, Ревматология, Сексология, Стоматология, Терапия, Урология, Фармакология, Хирургия, Эндокринология, Другие специальности:, Анестезиология Ангиология, Гепатология, Наркология, Нейрохирургия, Неонатология Ортопедия, Офтальмология, Проктология, Реаниматология, Травматология, Фтизиатрия,

Сайт Библиотека Здоровья - Большая медицинская библиотека - www.med2000.ru (до 1999г - www.gabr.org) создан в 1998 году

©Med2000.ru, Gabr.org

Правила копирования информации с сайта Мед2000 для использования в Интернет

Представленная на сайте информация не должна использоваться для самостоятельной диагностики и лечения и не может служить заменой очной консультации лечащего врача.

Страницу лучше просматривать при среднем размере шрифта